Мультимолекулярный аминокислотный комплекс «Аксолотоль»

Препарат с регенеративными свойствами из бластемального материала (скопление неспециализированных клеток на раневой поверхности после ампутации органа) аксолотля мексиканского (Ambystoma mexicanum).

Изобретение относится к области восстановительной медицины, а именно к активации регенеративных способностей у человека и животных при повреждении тканей с различной степенью тяжести поражения, при хроническом и остром течении деструктивных процессов в организме, в том числе стрессе.

Авторами рассматривается вопрос о разработке эффективного средства регенерации. Был выбран метод применения биологического лекарственного средства полученный на основе градуальной технологии, отвечающему, общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и ОФС на конкретные лекарственные формы, в виде которых они производятся: мази, спреи, таблетки, растворы, капли, пластыри.

В качестве биоматериала используется мультимолекулярный аминокислотный комплекс «Axolotl», состоящий из бластемальных клеток верхнего слоя эпидермиса формирующееся бластемы у аксолотля мексиканского (Ambystoma mexicanum). Действующее вещество имеющее высокую биологическую активность (белок nAG. Белок nAG (anterior gradient) является лигантом белка Prod 1 регулирующим процесс регенерации) получено на основе градуальной технологии, 0,01% раствор ЕМД (едениц модифицирующего действия) на 1 литр лекарственной формы.

Основной особенностью этого метода является универсальность воздействия на все виды тканей, в т.ч. на кровь и лимфу, без необходимости применения специфических антител.

Созданный по градуальной технологии мультимолекулярный аминокислотный комплекс Axolotl формирует условие запуска процесса истинной регенерации организму с деструктивными процессами в тканях, органах и системах имеющие различные физиологические способности к восстановлению. Фармацевтический способ воздействия препарата на сигнальные пути простагландинов создает условие восстановления саногенеза путем направленной индукции активаторов или ингибиторов разных компонентов сигнального пути простагландинов.

Известные аналоги:

Наиболее сходным к предложенному является метод близкий по функциональному значению применение Эритропоэтина как индуктора регенерационных процессов в поврежденных тканях органах. (Москва RU 2 542 391 C2 СПОСОБ РЕГЕНЕРАЦИИ ТКАНИ. БАДЕР, Аугустинус (DE)

К недостаткам этого метода можно отнести вероятное развитие аутоиммунных состояний и неконтролируемость процессов пролиферации стволовых клеток. А для активации экспрессии эндогенного ЭПО (эритропоэтин) необходимость введения факторов роста (гормональная терапия), с вероятность нарушение саногенеза эндогенного ЭПО.

Технологии репаративной (регенеративной) медицины отражены в изобретении «Способ стимуляции регенерации тканей» (Russia RU2634576C1 Inventor: Глеб Николаевич Зюзьков, Елена Владимировна Удут, Лариса Аркадьевна Мирошниченко , Елена Владиславовна Симанина, Татьяна Юрьевна Полякова, Александр Васильевич Чайковский, Лариса Александровна Ставрова, Вадим Вадимович Жданов) Регенерацию тканей стимулируют при моделировании кожной раны у мыши с помощью наружного применения SDF-1/

Эта методика имеет свои недостатки. Для достаточно интенсивного процесса грануляции поврежденной дермы требуется интенсификация миграции стволовых и мобилизованных G-CSF клеток предшественников из крови попадают в условия, в которых регенерационный потенциал затруднен. При этом затрудненный процесс «приживаемости» мигрировавших стромальных клеток приводит к их истощению, что создает дефицит элементов эпителия для достаточного развития грануляции.

На текущий момент нами создан универсальный мультимолекулярный аминокислотный комплекс Axolotl, влияющий на процессы регенерации любых органов и систем с различным этиопатогенезом повреждения (травматическая болезнь, интоксикации, раннее старение, аутоиммунные процессы, пре и постнатальные аномалии развития), существенно ускоряющим процесс восстановления.

Этот препарат представляет собой последовательный сбор клеточного материала процесса регенерации травмированного аксолотля (мексиканская амблистома), . Данная группа препаратов уже доказала свою эффективность

Биологи из США и Испании провели серию экспериментов, в результате которых удалось показать, что регенерация конечностей у позвоночных регулируется теми же белками-регуляторами, которые управляют развитием конечностей эмбриона. Белки образуют два сигнальных и регулирующих каскада, первый Wnt/beta-catenin (о роли белка Wnt в развитии червя Caenorhabditis elegans), и второй BMP (по названию ключевого белка BMP, bone morphogenetic protein). Ученые сконструировали вирусы способные воспроизвести в организме подопытных животных бета-катенин (основной участник Wnt-каскада) и BMP, где без участия регулирующего каскада Wnt/beta-catenin реализовывал восстановление конечностей у половозрелых лягушек не полностью. В целом, полученные результаты этого исследования указывают на то, что восстановление конечностей осуществляется на основе той же программы развития, которая управляет развитием конечностей у эмбриона. И эту программу можно включить у животных, которые в нормальных условиях как бы утратили способность к регенерации (репарации), так как программа эмбриогенеза есть у всех.

Журнал Cell Reports опубликовал интересную работу в этой области. Речь идет о земноводном – шпорцевой лягушке. Ученые создали стенд, где создали условие для нормального прорастания лапки у взрослой особи, применив гель на основе протеинов шелка с добавлением прогестерона. Погруженная на 24 часа культя в этот гель запустила процесс регенерации конечности, длившийся 9 месяцев.

Из вышесказанного следует, что существует множество регулирующих каскадов и рецепторных механизмов, влияющих на активацию регенераторных механизмов у высших животных. В трудах профессора, доктора биологических наук Л. Полежаева, отраженные в журнале «Наука и Жизнь» №10, 1974 г, говорится об определенном направлении исследований в области регенерации, и о перспективах реальной возможности выращивания у человека утраченных тканей, конечностей и участков жизненно важных органов, и что эта задача разрешима.

Известно, что механизм регенерации идет под управлением нескольких регуляторных белков и их комплексонов, которые руководят процессом образования утраченных органов в соответствии с онтогенезом (индивидуального развития). Такая генетическая программа присуща всему живому видовому разнообразию, и может рассматриваться как индивидуальная программа

Таким образом, человеческий организм тоже способен к регенерации. Но в следствии эволюционного развития до более сложной системы, процесс рубцевания стал приоритетным, без потерь способностей к регенерации. По одной из многочисленных гипотез, преобладание активности процессов рубцевания перед регенераторными обусловлена стремлением системы к сохранности личности высшего порядка (мышление, чувства, память и пр.), не считаясь со «второстепенными» потерями активно заращивает поврежденные системы и органы в постнатальном периоде развития.

Полученное средство, многократно усиленное градуальной технологией, является управляющим сигналом регенерации для иммунной системы всех теплокровных, становясь сигналом приоритета. Являясь неспецифическим раздражителем, действие средства образует обратную связь с центральной и нейроэндокринной системой, где формируется каскад процессов соответствующих истинной регенерации, со специфическими свойствами онтогенеза и морфогенеза отдельно взятого организма. Данный управляющий сигнал регенерации у теплокровных запускает процесс регенерации по принципу подобия.

В частности предъявленное к рассмотрению средство применимое в восстановительной и эстетической медицине и может быть использовано для повышения эффективности и значительного сокращения сроков реабилитации при различных травматических факторах, так как создает (в организме теплокровных) условие доминирования процессов регенерации перед рубцеванием.

Разработка может быть использована в качестве эффективного средства для повышения качественной и количественной эффективности процесса восстановления поврежденных тканей и систем.

Рабочими моделями, подтверждающие эти и другие подобные исследования, явились частные случаи применения мультимолекулярного аминокислотного комплекса «Axolotl». В данном препарате авторы реализовали управляющий сигнал пускового и рабочего механизма неконфликтного эмбриогенеза регенерации тканей у человека.

Выше сказанное привело к мысли о возможности «свести в одну точку» весь процесс регенерации Аксолотля, в виде единого комплекса поэтапного обработанной фармацевтической субстанции действующего вещества градуальной технологией во время процесса регенерации. Что, по мнению авторов, должно позволить инициировать программы регенерации организма человека, как конституциональные, с одновременным предоставлением организму подробной информации о способах их реализации. Без потери качества лечения. Что подтверждается практикой авторов. По сути, данные препарату представляют новую группу биологических лекарственных препаратов, специфическая активность которых обусловлена действующим веществом, содержащим два белка Белок nAG anterior gradient и Prod 1, полученным из фармацевтической субстанции

Полученный мультимолекулярный аминокислотный комплекс «Axolotl» содержат активную структуру исходного материала, его потенциальных, в том числе токсических свойств, и реальных биохимических и биофизических процессов, происходящих в исходных биологических объектах, в том числе и в неблагоприятных условиях (травма, шок, болезнь, гибель, регенерация, восстановление). Действующее вещество может быть использована как по принципу подобия так и по принципу аналогии. Актуальны иные аспекты эволюционных программ аксолотля, основанных на том же принципе.

Мультимолекулярный аминокислотный комплекс Axolotl, включает все этапы восстановления ампутированного хвоста аксолотля. То есть, начиная со стадии травматического шока и далее, включая все фазы, вплоть до формирования нормальной структуры утерянной части органа. Именно такой комплексный препарат оказался наиболее эффективным. В отличие от различных, отдельных этапов процесса регенерации аксолотля. Объяснить этот факт можно исходя из модели, в которой организму одновременно представляется сигнал, инициирующий процессы регенерации включая предоставление этому организму информации о возможном пути преодоления/восстановления в виде регистрации всех основных этапов регенерации вплоть до полного восстановления.

У авторов уже имеется определенный опыт по применению данной группы средств. В частности, в процессе применения, стало понятно, что наиболее часто, по результатам тестирования, желательно применять метод приготовления препарата по градуальной технологии (ОФС.1.7.0001. Приказ Минздрава России 20 07 2023 №377), в 5% спиртовом растворе в соотношении 0,025% ЕМД (единиц модифицирующего действия).

Одним из таких средств, способствующих высокому уровню регенерации, является «Тритурус регенерация», из травмированной взрослой особи тритона иглистого (амбистомы), но у препарата «Тритурус регенерация» есть недостатки, заключенные в способе приготовления.

В предыдущих работах, исходное вещество собиралось в пробирку путем обмывания (орошения) дистиллированной водой из областей травматизации (культя хвоста тритона иглистого). Но регулировать точный объем собранного материала не представлялось возможным. Принимая во внимание, что подготовленный объем заготовки подлежит градуальной технологии в нейтральной среде (этанол 5%), с неконтролируемым объемом фармацевтической субстанции. При этом уровень активности конечного препарата может иметь непредсказуемую эффективность.

Для улучшения качества влияния саногенеза процесса регенерации и стабильности биологического лекарственного препарата, созданного по градуальной технологии был изменен алгоритм сбора фармацевтической субстанции.

Пересмотр травматической модели привел к решению смены объекта эксперимента на земноводную Аксолотль мексиканская амбистома (Ambystoma mexicanum) из семейства амбистом, и метода приготовления фармацевтической субстанции. Определяющие принципиальную новизну в технологии изготовления, и расширение функциональных особенностей терапии.

Материал полученный из бластемы (скопление неспециализированных клеток на раневой поверхности после ампутации органа) регенерирующего аксолотля, в способе приготовления препарата «Axolotl» эффективней инициирует процессы истинной регенерации.

При этом не ограничиваются возможности глубокого резерва компенсации, участвующего в процессах саногенеза. Кроме того, препарат регенерации не вызывают нежелательных побочных эффектов, что существенно расширяет сферу их клинического применения.

Разработка направлена на создание эффективного средства для увеличения содержания регенераторно-компетентных клеток во всех фазах восстановления, от шока до полной компенсации, при полном отсутствии токсичности и возможностью длительного применения.

Мультимолекулярный аминокислотный комплекс «Axolotl» представляет собой форму к фактору стволовой клетки, позволяет стимулировать продукцию стволовых клеток, их дифференцировку, регулируемый митоз (деление клеток) без потери ресурса. Не имеет побочных эффектов, что подтверждено экспериментально.

Мультимолекулярный аминокислотный комплекс «Axolotl» применим в качестве стимулятора и корректора регенерации, при травматической болезни, и других острых и хронических заболеваниях. В качестве стресс протектора, а так же тератопротектора, наследственные дегенеративные заболевания, и как частный случаи геронтопротектора, с целью предупреждения преждевременного старения, к которому может быть отнесено основное большинство случаев старения.

Учитывая, что многие хронические заболевания могут рассматриваться в эволюционном контексте, как нарушение регуляции отдельных этапов процесса регенерации, препарат может быть использован при таких патологических процессах, как нарушение эпителизации, хронические воспалительные процессы и недостаточность иммунных и воспалительных реакций.

Исходя из патогенеза, особыми показаниями к применению препарата являются: острые и хронические заболевания нервной системы, как центральной, так и периферической. Травмы, в т.ч., сотрясения и ушибы, корешковый синдром, остеохондроз, астено-невротическое состояние, миелит, энцефалит, инсульт, в т.ч., геморрагический синдром. Поражения опорнодвигательного аппарата: артриты – артрозы, с вовлечением хрящевых структур и связочного аппарата, остеопороз. Заболевания позвоночника, как травматического генеза, так и воспалительного – метаболического с вовлечением мышечного и связочного аппарата, нервных структур. Дискогенные поражения позвоночника. Характерно – сильные ломящие боли в суставах.

Обширные гематомы, локальные и генерализованные отеки. Заболевания селезенки и поджелудочной железы. Заболевания печени (цирроз, жировое перерождение).

Кроме того, препарат может быть использован при лечении хронических болезней, как последствий травм (как физических, так и психических). Поскольку мультимолекулярный аминокислотный комплекс «Axolotl» оказывает воздействие на глубокие генетические механизмы, он может использоваться (по опыту авторов) в случаях нечувствительности пациента к терапии, торпидности адаптивных и саногенных реакций, а так же в случаях не проявленной конституции пациента, например, как следствия длительной медикаментозной терапии (подавления). В этом случае препарат можно рассматривать как имеющий актуальность при: недостатке регенерационных способностей; в случаях избыточных реакций отдельных тканей и органов, например, их разрастание, либо; при неравномерности процессов; при деструктивной составляющей, например, преобладание остеопороза, ассиметрия процессов.

Описание способа приготовления мультимолекулярного аминокислотного комплекса Axolotl

Комплекс представляет собой материалы (скопление неспециализированных клеток на раневой поверхности после ампутации органа) собранные от травмированного аксолотля. Имеет улучшенные терапевтические характеристики в сравнении с предшествующими разработками (Тритон иглистый, регенерирующий). Увеличение эффективности производилось путем изменение модели сбора исходного вещества.

Мультимолекулярный аминокислотный комплекс Axolotl изготавливается путем соскоба ватным тампоном верхнего эпидермиса растущей бластемы в травмированной зоне на теле аксолотля.

Смыв производится как с проксимальной, так и дистальной части бластемы, для последующего смешения ингредиентов активатора роста.

В смыве содержится части верхнего эпидермиса бластемы с фрагментами его железок, которые в свою очередь содержат белок nAG. Белок nAG (anterior gradient) является лигантом белка Prod 1 регулирующим процесс регенерации.

Полученный смыв на тампоне погружается в дистиллированную воду (5 мл), где активно перемешивается в течении 2 минут на орбитальном смесителе. За это время часть эпидермиса бластемы с железками переходит в воду благодаря механическому воздействию и смене парциального давления солей между клеткой и дистиллированной водой, где происходит окончательный лизис клеток, с разрушением мембран и выводом в раствор цитоплазматических элементов. Таким образом, достигается непрограммируемый апоптоз клетки эпителия с сосочками, без воспалительного процесса и участия функциональных аналогов эукариотических белков апоптоза.

Конгломерат белков, полученный способом градуальной технологии, в 5% водно-спиртовом растворе этанола, в пропорции 0,025% на 1 литр раствора ЕМД (единиц модифицирующего действия. Согласно ОФС.1.7.0001. Приказ Минздрава России 20 07 2023 №377), является основой мультимолекулярного аминокислотного комплекса Axolotl.

Фармацевтическая субстанция вносится в конкретную лекарственную форму с использованием вспомогательных веществ, таких как спиртовые и водные растворы, масла, соли, гели, сахара.

Способ применения:

Наружное: Мазь, гель, крем: наносить на проблемные участки кожи или над местом патологического процесса 1 раз в день вне зависимости от остроты процесса. Небольшим количеством легко втереть в кожу. Применяется при повреждении кожных покровов, костной и сухожильной ткани, поражении сосудов со вторичными признаками нарушения трофики и инфицировании, поражении нервной ткани как периферической так и центральной нервной системы.

Можно использовать в виде аппликаций на открытую рану, под повязку. Для этого, мазь наносится стерильным шпателем на стерильную салфетку таким образом, чтобы мазь покрыла салфетку не сплошным слоем (эффект припудривания). Приготовленные салфетки наложить на санированные раны, чтобы они покрыли всю ее поверхность, с захватом неповрежденных участков на 2 – 3 сантиметра, Условие обязательное!

Смена повязок с интервалом 1 – 5 дней.

Допускается применение турунд с незначительной пропиткой мазью (вазелиново-ланолиновая основа, соблюдается эффект «омыливания»), для введения их в раневой

канал, для ускорения выгнаивания раны, ускоренного процесса заживления и предотвращения фиброза.

Смена дренажа 1 раз в сутки (при интенсивной экссудации).

При келоидных рубцах провести иссечение рубца (вторичное травмирование обязательно), сразу после ушивания раны обрабатывать мазью раз в день. Допускается нанесение мази на участки обработанные Бриллиантовый зеленым, или другим антисептиком кроме Фукорцина, соблюдая остальные правила. Допускается образование фистул и дренажных каналов как саногеннетичекая реакция самоочистки травмированного участка. В этом случае дополнительных мер не применяется, кроме поддержания открытости канала дренажа.

Смена повязок 1 – 3 дня.

В случае наличия гипсовой повязки на конечности, учесть парность органа. При невозможности нанести препарат под гипс, применить втирание мази на вторую конечность, «зеркаля» места повреждения.

Если парность соблюсти нельзя, к примеру, поражение грудной клетки, то наносить мазь выше, или ниже фиксирующего материала, по фронтальной и сагиттальной плоскости.

Повторы раз в день, до удаления гипсовой (фиксирующей) повязки. Долечивание проводится уже на пораженной стороне. Продолжительность не ограничена.

В случае поражения двигательной сферы, втирать мазь в области основания черепа.

Ежедневно. Длительно.

В случае нарушения эмоциональной области, втирать мазь в лицевую область. Ежедневно. Длительно.

Условия применения мультимолекулярного аминокислотного комплекса Axolotl

Во всех случаях применения препарата регенерации не использовать «Перекись водорода» для санации раневой поверхности. В противном случае скорость репаративных реакций значительно снизится.

В случае обработки поверхностных и глубоких ран мазью регенерация, стараться избегать применение Фукорцила и составов на основе Йода.

В случае поражения дыхательной системы (нос, гортань, трахея, бронхи, альвеолы, плевра), не применять в качестве антисептика «Раствор Хлоргексидина биглюканат 0,05%».В противном случае могут возникнуть обострение в заинтересованной области из-за тропности этого в-ва к дыхательной системе..

Во множестве случаев применения препарата регенерации возможно образование спонтанных дренажных каналов. Это саногенная реакция вызванная препаратом. Применение антибиотиков допускается, для предотвращения возможно-генерализованного процесса воспаления, и на усмотрение лечащего врача.

Примеры применения мультимолекулярного аминокислотного комплекса Axolotl «AXOLOTL»:

• При травмах сокращает периоды фаз воспаления, пролиферации и регенерации тканей.

• быстро и эффективно останавливает и редуцирует кровоизлияния и отечности мягких тканей в месте повреждения,

• повышает тонус сосудов и уменьшает их проницаемость,

• купирует болевой синдром (за счет снижения интенсивности отека),

• Тормозит естественные процессы старения кожи (эластичность, трофика, гидротация)

• Предотвращает образование грубой фиброзной ткани (рубцов) за счет ускорения процесса заживления (репаративной регенерации) поврежденной кожи.

• Смягчает старые рубцы, улучшает питание пораженных и окружающих тканей, частично или полностью восстанавливая функцию травмированной области.

• Устраняет воспаление в мягких тканях

• Восстанавливает нервную ткань при заболеваниях периферической и центральной нервной системы.

• Применим для предотвращения тотальной или гнездной алопеции, при раннем облысении. Регенерирует все структуры кожи головы.

• Кожные заболевания: трофические язвы (различного генеза), экземы, опрелости, нейродермит, нарушение пигментации, морщины, ранее увядание кожи, и пр.;

В сочетании с другими препаратами позволяет добиться снижения их дозировки одновременно с повышением эффективности комплексного лечения.